盛巍，王洪亮，杨艳芳，汪仁芸，夏学军，李琳，金笃嘉，叶军，刘玉玲*（中国医学科学院北京协和医学院药物研究所&药物传输技术及新型制剂北京市重点实验室，北京 100050）
摘要：
目的 制备盐酸尼卡地平（Nic）β晶型，实现与原研产品晶形一致；探讨固体分散体技术对Nic溶解度的改善效果。
方法 采用丙酮重结晶法制备Nic原料药并进行化学纯度、熔点和晶型检测；以PVPK30、PEG6000、普朗尼克F68为载体材料，制备Nic固体分散体，考察载体材料用量及其对溶解度的影响，采用示差扫描量热、X射线粉末衍射、傅里叶变换红外光谱进行物相鉴别和作用机制探讨。
结果 制得的Nic原料药，熔点为169.2～171.2℃，化学纯度＞99.3%，特征衍射峰与文献报道完全一致。3种载体均可与Nic通过分子间相互作用形成固体分散体，药物由晶态转变为无定型态，当Nic/载体为1∶3时，溶解度由11mg·mL－1提高至160mg·mL－1。结论 成功制备了与原研一致的β晶型Nic，采用固体分散体技术，Nic溶解度可显著改善，为后续渗透泵控释制剂研发提供了良好的中间载体。
关键词：盐酸尼卡地平；β晶型；固体分散体；一致性；溶解度
盐酸尼卡地平（Nic，结构见图1）为第2代二氢吡啶类钙拮抗剂，具有选择性高、心脏毒性低、疗效好的特点，临床上广泛用于高血压和心绞痛的治疗，是降压的首选药物之一。Nic共有5种晶型，分别为α晶型、β晶型、二水合物、甲苯合物和氯仿合物，它们具有不同的DSC、TG、X射线衍射及熔点特征。其中，α晶型和β晶型的熔点分别为179～188℃、164～171℃[2]。Nic制剂最早由日本研发，之后在美国及欧洲上市，根据日本、美国、欧洲等上市的Nic制剂药品说明书，使用的原料药熔点均为169～171℃，提示原研产品均为β晶型原料。中国在20世纪90年代进行了仿制，并将Nic原料药收入中国药典，但记载的熔点为179～185℃，表明中国仿制的Nic为α晶型。
图 1 盐酸尼卡地平化学结构
随着国家一致性评价的逐渐推进和完善，晶型一致性已成为业界关注的重点内容之一，因此，有必要对Nicβ晶型进行研究。
此外，为降低因血药浓度波动对安全性及平稳降压的影响，地平类降压药物较少以普通制剂形式存在，而多以缓控释制剂用于临床治疗。其中可实现24h平稳释药的渗透泵制剂成为国际公认的黄金给药剂型，如最具代表的硝苯地平渗透泵（拜新同）。但渗透泵制剂对药物溶解度要求较高，易于产业化的单层渗透泵通常为50～300μg·mL－1。而无论何种晶型的Nic，溶解度都很难达到要求。目前Nic用于临床的只有日本研发的2次·d－1的缓释微丸胶囊（佩尔），未见渗透泵制剂上市。
基于上述问题，本研究首先通过重结晶方法的优化，制备β晶型Nic，在此基础上，探讨固体分散体[7-8]对Nic的物相状态影响及溶解度改善效果，为后续渗透泵控释制剂研发提供满足溶解度要求的中间载体。
1 材料
1.1 仪器Agilent1200高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）；RC806D智能溶出仪（天津天大天发公司）；恒温振荡器（北京鼎丰盛公司）；RV8V旋转蒸发仪（德国艾卡公司）；DZF-6050真空干燥箱（上海博讯实业有限公司）；MP70熔点测定仪（METTLERTOLEDO）；Nicolet5700傅立叶变换红外光谱仪（美国热电公司）；D8advanceX射线粉末衍射仪（德国布鲁克公司）；6200热分析测定仪、DSC-6200差示扫描量热仪（日本Seiko仪器公司）。
1.2 试药
盐酸尼卡地平对照品（批号：100586-200401，中国食品药品检定研究院，纯度：99.9%）；盐酸尼卡地平粗品（批号：141017，山东济南科汇医药科技有限公司）；普朗尼克F68（批号：WPJ526B，德国BASF公司）；PVPK30（批号：0001693619，美国亚什兰公司）；PEG6000（11/36，德国Sasol公司）；重蒸丙酮（自制）；甲醇（色谱纯），其他均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 Nicβ 晶型的制备
参照文献，取5gNic粗品，用25mL甲醇溶解，超声使其溶解，40℃水浴旋转蒸发3.5h至发泡，得疏松黄色泡状固体。向上述固体中加入18mL重蒸丙酮，于－40℃以下搅拌，60℃减压干燥，过100目筛，继续60℃常压干燥12h，最终得到Nicβ晶型（Nic原料药）。
2.2 Nic晶型表征
2.2.1 有关物质与含量测定
采用HPLC方法测定所制备的Nic原料药的含量及有关物质。色谱条件如下：
仪器：色谱柱：KromasilC18（250mm×4.6mm，5µm）；流动相：水（用0.016mol·L－1磷酸氢钾与磷酸氢二钾缓冲液调pH＝6.8）-甲醇＝28∶72；检测波长：236nm；柱温：40℃；流速：1.0mL·min－1；进样量：20µL。
对照品溶液：取Nic对照品25mg，精密称定，置50mL量瓶中，加甲醇超声溶解，定容。作为储备液A，即得有关物质测定对照品溶液。精密量取1mL储备液A至10mL量瓶，加甲醇定容，即得含量测定对照品溶液。平行配制3份。
供试品溶液：精密称取所制备的Nic原料药25mg，置50mL量瓶中，加甲醇超声溶解，定容。作为储备液B，即得有关物质测定供试品溶液。精密量取1mL储备液B至10mL量瓶，加甲醇定容，即得含量测定供试品溶液，平行配制3份。
测定：分别精密量取有关物质对照品溶液和供试品溶液20μL，进样测定，采用归一化法计算有关物质。分别精密量取含量测定对照品溶液和供试品溶液20µL，进样测定，采用外标法计算Nic含量，结果见表1。
由表1结果可以看出，制得的Nic原料药纯度较高，3批平均含量为99.66%，有关物质含量≤0.15%。
2.2.2 熔点测定
将制得的Nic原料药装入测熔点的毛细管内，缓慢间接加热，升温速率为1℃·min－1，观察样品开始液化时温度和完全液化的温度。由此测得药物熔点为169.2～171.2℃，与文献报道的β晶型结果一致。
2.2.3 DSC测定
取制得Nicβ晶型及Nic对照品适量，进行DSC扫描。升温速率：10℃·min－1，扫描范围：25～250℃，氮气流速：60mL·min－1。结果见图2。Nic对照品熔融峰出现在约183℃，表明为α晶型，而本文制备的Nic原料特征吸热峰为169.2℃，与文献报道一致，表明为β晶型。
其它方法略，请参考原文献。
3 讨论
晶型是影响药品疗效的重要因素，药物晶型状态包括原料药的状态和原料药在制剂中的状态。早在20世纪50年代，人们就已经意识到药物的晶型状态会对药物的疗效产生一定影响。但在我国仿制药物的研发过程中，由于技术和条件的限制，这一观念一直未受到重视。
本文通过对盐酸尼卡地平的晶型研究发现：制备温度是获得其α晶型与β晶型的关键工艺条件。α晶型可在25℃条件下制得，而β晶型需要在比较苛刻的－40℃条件下制备，且制备工艺要求高于α晶型。
β晶型原料药溶解度约为11mg·mL－1，优于α晶型的7mg·mL－1，但仍无法满足渗透泵制剂对药物溶解度的要求。为此，在β晶型原料药制备基础上，本文对固体分散体增溶效果及形成机制进行了考察。当药物/载体在1∶1以上时，PVPK30、PEG6000、普朗尼克F68均可通过分子间相互作用形成固体分散体，其中以PVP增溶作用最为突出，1∶1用量即可使溶解度增至10倍以上。当药物/载体＝1∶3时，3种载体的增溶效果无明显差别，均可增至14.5～16.4倍，当药物/载体＝1∶5时，增溶效果趋于恒定。
本文成功制备了β晶型原料药，并通过固体分散体技术使溶解度显著增加，对盐酸尼卡地平及其制剂的一致性评价具有重要学术价值，为后续的渗透泵控释制剂研发提供了高溶解度的中间载体。
